期刊简介
本刊贯彻党和国家卫生工作方针政策,反映医学科学技术的新理论、新技术,新进展,报道医院管理理论研究和实践探索的创新和发展,聚焦医疗卫生改革的前沿态势和研究热点,把握带有挑战性的"齐放"和"争鸣",增进海内外医院相关领域学术交流与合作。具有改革的前列意识以及广东医疗卫生行业理念、经验的开拓创新特色。
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首页>现代医院杂志
- 杂志名称：现代医院杂志
- 主管单位：广东省医院协会
- 主办单位：广东省医院协会
- 国际刊号：1671-332X
- 国内刊号：44-1534/Z
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
小鼠趋化因子受体7特异性shRNA腺病毒表达载体的构建和鉴定
何伟；秦如斋；张小冬；刘文丹；潘春华
关键词：小鼠CCR7受体, RNA干扰, 腺病毒载体
摘要：目的 构建小鼠CC趋化因子受体7(CCR7)基因特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,研究其对CCR7分子表达的影响.方法 根据小鼠CCR7 mRNA序列,设计三个shRNA序列,并插入表达载体pHBAd-U6-GFP中,经基因测序鉴定.然后用获得的重组CCR7 shRNA表达载体转染人胚肾细胞HEK293,进行病毒包装、出毒和扩增,测定病毒滴度TCID50,并用重组腺病毒感染小鼠MEF细胞,观察细胞绿色荧光强度,Western Blotting检测CCR7蛋白的表达.结果 基因测序证明:获得的三个shRNA载体序列与原设计序列完全相符,扩增后的病毒上清滴度分别为:1.0×1010、1.6×1010和1.25×1010 PFU/mL.Ad CCR7 shR-NA1腺病毒可明显下调小鼠MEF细胞CCR7蛋白表达.结论 成功构建了小鼠CCR7特异性shRNA腺病毒表达载体,并获得了高滴度病毒上清,为以后研究肿瘤淋巴转移的分子机制和信号通路打下了坚实的基础.
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